免费啪视频在线观看,世界美女日逼视频,操我,操我嗯额视频,亚洲午夜精品一区二区

咨詢熱線(微信同號)

18017847121

當前位置:首頁  >  技術文章  >  ELISA 實驗常見問題解析

ELISA 實驗常見問題解析

更新時間:2022-04-23      點擊次數(shù):1402

   ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié),可能會對最終的實驗結果產(chǎn)生比較大的影響,比如實驗出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。

     1.白板現(xiàn)象
     在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:試劑已過保質期,不同批次稀釋液交叉使用。錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中,酶標記物被污染失活,稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等。配置稀釋液的蒸餾水可能被污染。洗滌液是濃縮型的,沒有按比例進行稀釋。酶標記物的活性和效價比較低。溶液的PH值不正確,一般稀釋液的PH值應保持在7.2-7.4。
 
     2.顯色弱靈敏度低
     在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中孔的顯色比較淺,即只有微弱的信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:產(chǎn)品過有效期,試劑沒有按規(guī)定進行適當?shù)谋4妗?/span>試劑,標準品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當。洗板或者加樣過程中,酶標物受污染失活。孵育時間和孵育溫度未達到實驗要求。洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗板次數(shù)過多,洗板沖擊力過大,洗板浸泡時間過長。底物溶液TMB顯色時間太短。
 
    3.花板無梯度背景高
    在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中的孔有顏色但沒有梯度,背景也可能較高,。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實驗前溶液已經(jīng)變藍。孵育溫度過高或者孵育時間過長,發(fā)生了較強的非特異性吸附。沒有按說明書要求洗板,特別是洗板時洗滌液的量少加了。加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。花板現(xiàn)象:低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體,封閉不足導致的本底不穩(wěn)定,洗板不充分,包被板子的問題。
 
    綜上所述:在ELISA實驗中應注意以下問題:
    1.在實驗前應該按相關要求將實驗試劑平衡至室溫。
    2.包被抗體和檢測抗體應該是有高活性的且都針對同一抗原。
    3.試劑保存:蛋白抗體類試劑保存于-20攝氏度,顯色液洗滌液保存于2-8攝氏度。
    4.各試劑在使用前應充分混勻,以保證試劑的均一性和準確性。
    5.嚴格控制反應溫度和反應試劑。
    6.洗板次數(shù),洗板液的量,洗板液浸泡時間的長短,洗板的力度都是應該注意的問題。
    7.相關濃縮液應按要求稀釋到相應比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之間。
    8.在終止反應時盡量避免微孔中存有氣泡。

    9.終止反應完成后應該在2min內(nèi)完成酶標儀讀數(shù)。(轉載)


上海達為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關注我們

歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息

掃一掃
關注我們
版權所有©2025上海達為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:159847
管理登陸    技術支持:化工儀器網(wǎng)    
亚洲午夜久久久久电影网| 国产精品亚洲玖玖玖在线观看| freexxx性欧美另类极品| 久久久久999| 少妇真实被内射视频三四区| 亚洲人成亚洲精品| 97人人超碰国产精品最新| 日韩超碰| 亚洲一级内射| 国产精品123| 激情久久| 天天夜碰日日摸日日澡性色AV| 国产在线视频免费观看| 国产l精品国产亚洲区久久| 老太性开放bbwbbwbbw| 亚洲精品色| 亚洲丁香婷婷久久一区二区| 夜夜爱夜夜做夜夜爽| 亚洲精品国产摄像头| 国产亚洲精选美女久久久久| 99久久精品费精品国产一区二| 国产精品国产亚洲精品看不卡 | 美女内射无套日韩免费播放| 两女女百合互慰AV赤裸无遮挡| 亚洲第一无码AV无码专区| 天堂…在线最新版在线| 保定市| 欧美精品一区二区三区不卡| www.人妻| 69久久久久精品9999不卡片| 色一区二区| 精品久久久久久久一区二区| 登封市| 国产成人一区二区三区免费 | a级视频在线观看| 亚洲中文久久| 密熟成桃时1997国语版| 亚洲一道本| 年轻漂亮岳每4乱理2| 达日县| 国产拍揄自揄免费观看|